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軍團(tuán)菌乳膠凝集試劑盒
一、用途
軍團(tuán)菌乳膠凝集檢測(cè)試劑用于快速確證鑒定從選擇性平板上分離出的可疑嗜肺軍團(tuán)菌和常規(guī)分離的軍團(tuán)菌。試劑盒適用于檢測(cè)由疑似嗜肺軍團(tuán)菌引起的肺炎病人的樣品或環(huán)境樣品。試劑盒可分別檢測(cè)嗜肺軍團(tuán)菌血清1群和2-15群和常規(guī)分離的軍團(tuán)菌。(根據(jù)微生物檢測(cè)手冊(cè)提及嗜肺軍團(tuán)菌血清16群，血清16群與血清6型交叉反應(yīng)，因此理論上2-15群乳膠試劑也與血清16群凝集)。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。
二、原理
測(cè)試試劑1，乳膠顆粒表面包被與嗜肺軍團(tuán)菌血清1群具有特異性的兔多克隆抗體。測(cè)試2-15群試劑的乳膠顆粒表面包被與嗜肺軍團(tuán)菌血清2-15群特異性的多克隆兔抗體。軍團(tuán)菌菌種測(cè)試試劑，乳膠顆粒表面包被與10種常規(guī)分離的軍團(tuán)菌血清具有特異性的兔多克隆抗體。(參見以下表格)當(dāng)乳膠顆粒與含軍團(tuán)菌或者從相關(guān)的軍團(tuán)菌加熱滅活的抗原的懸液混合后，發(fā)生免疫化學(xué)反應(yīng)，使乳膠顆粒迅速凝集。血清1群抗體包被的乳膠顆粒只在遇到血清1群的抗原時(shí)才會(huì)發(fā)生凝集，同樣，血清2-15群抗體包被的乳膠顆粒只有在遇到血清2-15群中的任何一種抗原時(shí)，才會(huì)發(fā)生凝集。軍團(tuán)菌抗體包被的乳膠顆粒與10種相關(guān)的軍團(tuán)菌會(huì)發(fā)生凝集。(參見以下表格)
血清1群乳膠試劑與血清1群抗原的反應(yīng)比血清2-15群乳膠試劑與血清2-15群抗原的反應(yīng)較快較強(qiáng)。其原因?yàn)樵谏镌噭┻^程中2-15群抗體的混合彼此有一定的稀釋作用。軍團(tuán)菌乳膠與嗜肺軍團(tuán)菌血清1乳膠試劑的作用方法相同。
三、試劑盒組成成分
REAG TEST 1 1群測(cè)試試劑 HM4 軍團(tuán)菌血清1群乳膠試劑 2.5mL
乳膠顆粒包被與嗜肺軍團(tuán)菌血清1群特異性的兔多克隆抗體和鼠單克隆抗體。含0.099%的疊氮化na。(藍(lán)色瓶蓋)
REAG TEST 2-15 2-15群測(cè)試試劑 HM45b 軍團(tuán)菌血清2-15群乳膠試劑 2.5mL
乳膠顆粒包被與嗜肺軍團(tuán)菌血清2-15群特異性的兔多克隆抗體。含0.099%的疊氮化na防腐劑。(黃色瓶蓋)
+ 陽(yáng)性對(duì)照試劑 HM45c 陽(yáng)性對(duì)照 1.0mL
可與測(cè)試試劑1和2-15反應(yīng)的不具活性的軍團(tuán)菌的抗原，含0.099%的疊氮化na防腐劑。(黑色瓶蓋)
REAG TEST SPECIES 軍團(tuán)菌菌種測(cè)試試劑 HM45d 軍團(tuán)菌血清特殊乳膠試劑 2.5mL
乳膠顆粒表面包被與10種常規(guī)分離的軍團(tuán)菌血清具有特異性的兔多克隆抗體。(參見以下表格)
含0.099%的疊氮化na防腐劑。(紅色瓶蓋)
NaCl 0.85% 0.85%鹽水 HM40 0.85%生理鹽水 5.0mL
含0.099%的疊氮化na防腐劑。(白色瓶蓋)
使用說明書
檢測(cè)板
攪拌棒
需要的其它材料
l 接種環(huán)
l 軍團(tuán)菌選擇性分離培養(yǎng)基
l 用于煮沸處理的玻璃試管
l 0.85%生理鹽水
四、警告和注意事項(xiàng)
安全：
1、試劑僅供體外診斷使用。
2、 軍團(tuán)菌乳膠凝集試劑盒作防腐劑使用的疊氮化na可與鉛或銅制品反應(yīng)形成易爆的金屬疊氮化物。可用大量水沖洗以避免疊氮化物的堆積。
3、在處理或檢測(cè)可疑致病菌時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應(yīng)作中和處理。
4、陽(yáng)性對(duì)照液在生物試劑中已作惰性處理。但在使用中，依然應(yīng)遵循潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序。
檢測(cè)過程：
1、試劑盒應(yīng)按說明書使用。
2、所有試劑在使用前應(yīng)達(dá)到室溫。
3、不要稀釋試劑盒內(nèi)的任何試劑。
4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。
5、不要冷凍試劑盒內(nèi)的試劑。
6、不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽(yáng)性對(duì)照試劑或細(xì)菌樣品。
7、注意凝集狀態(tài)，呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實(shí)凝集。
8、使用前應(yīng)確保檢測(cè)板清潔干燥。
五、貯存及保質(zhì)期
檢測(cè)試劑盒不使用時(shí)應(yīng)貯存在2～8℃，并應(yīng)在包裝盒標(biāo)簽上的有效期內(nèi)使用檢測(cè)試劑。
六、樣本
檢測(cè)選擇性分離平板上分離的可疑軍團(tuán)菌菌落。
七、檢測(cè)過程
質(zhì)量控制：
在每次使用檢測(cè)試劑盒前應(yīng)作下列質(zhì)量控制檢測(cè)，以確證試劑的有效性。
1、檢測(cè)試劑的控制：輕輕搖勻測(cè)試試劑(HHM4，HM45b，HM45d)，將兩種測(cè)試試劑分別滴1滴于檢測(cè)板的二個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)，接著在兩個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)各滴1滴生理鹽水(HM40)，用2支攪拌棒分別在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻測(cè)試液和生理鹽水，輕搖檢測(cè)板2分鐘并觀察是否會(huì)出現(xiàn)凝集。如果出現(xiàn)凝集反應(yīng)，表明檢測(cè)試劑或生理鹽水受到污染，應(yīng)廢棄處理。
2、陽(yáng)性對(duì)照的控制：滴1滴陽(yáng)性對(duì)照試劑(HM45c)于1個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)，接著在該反應(yīng)環(huán)內(nèi)滴1滴混勻的測(cè)試試劑1(HM4)，不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽(yáng)性對(duì)照試劑。用攪拌棒在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻液體，輕搖檢測(cè)板2分鐘,應(yīng)觀察到凝集現(xiàn)象。重復(fù)上述步驟，做測(cè)試試劑2-15(HM45b)和軍團(tuán)菌菌種測(cè)試試劑(HM45d)的檢測(cè)，并應(yīng)觀察到凝集現(xiàn)象。如果其中一種測(cè)試試劑未出現(xiàn)凝集反應(yīng)，應(yīng)采用新鮮的檢測(cè)試劑盒。
測(cè)試程序：
1、各滴1滴生理鹽水(HM40)于檢測(cè)板的3個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。
2、用接種環(huán)從選擇性分離平板上挑取3～4個(gè)可疑軍團(tuán)菌菌落，分別在2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)的生理鹽水旁作涂片操作。
3、用攪拌棒在整個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)混勻生理鹽水和菌落，形成均勻的較濃菌懸液。
4、如果菌懸液保持均勻狀態(tài)，繼續(xù)第7步。如果菌懸液出現(xiàn)纖維狀或粒狀物(培養(yǎng)物較老或呈黏液狀時(shí)，易出現(xiàn)此種現(xiàn)象)，按下述步驟操作。
5、往玻璃試管中加入0.5mL的生理鹽水，從選擇性平板中挑取可疑菌落制成均勻的菌懸液。
6、煮沸菌懸液5分鐘，冷卻至室溫后，分別取30μL滴加在檢測(cè)板上2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。
7、輕輕的搖勻測(cè)試乳膠試劑(HM4,HM45b)，形成均勻的懸液。
8、滴1滴測(cè)試試劑1于一個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)的菌懸液上，滴1滴測(cè)試試劑2-15于另一個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)的菌懸液上。不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到菌懸液。
9、各用1支干凈的攪拌棒在整個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)混勻菌懸液和測(cè)試試劑。
10、輕搖檢測(cè)板2分鐘，并觀察凝集結(jié)果。
11、記錄結(jié)果后，將攪拌棒和檢測(cè)板進(jìn)行適當(dāng)?shù)南咎幚怼?/span>
八、結(jié)果說明
觀察凝集結(jié)果，按下表進(jìn)行判斷
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